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色谱常见使用问题的详细解答

发布时间:2016-03-09      点击次数:2554

问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?
  ( 答:关于漂移问题:
  1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定
  2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
  3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡
  关于快速变化问题
  1、流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定
  2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
  3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
  问:色质联用中毛细柱的选择应注意什么问题?
  答:1、柱效要高
  2、热稳定性好
  化学惰性强
  具体选择应注意
  1、柱极性。根据分析样品选择不同极性的柱子进行分析
  2、柱子内径。内径大小决定柱容量
  3、液膜厚度。分析样品温度一不一样,对膜厚有不同要求,温度高液膜要厚,温度低液膜要薄
  4、柱长度。柱越长,柱效越高,分离效果越好,但也存在吸附问题,柱子过长,分析时间长,因此要根据样品考虑柱子长度
  5、外涂层(柱体)的选择
  6、另外还有仪器型号、分析对象等因素
  问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?
  答:1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
  2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子
  ( 问:从那些方面可以简单判别毛细管柱子的热稳定性好坏?
  答:1、分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高温运行后,分配容量K不应有明显的下降,否则,说明柱子的热稳定性不好。
  2、理论塔板数n,热稳定性好的柱子经受高温后,理论塔板数应基本保持恒定
  3、柱子的极性。热稳定性好的柱子,高温前后极性变化不大,具体表现为保留指数I值没有大的变化。
  4、噪声。热稳定性好的柱子在高温下使用后,噪声不能增加.
  5、柱子的去活层,毛细管柱子涂固定液前内部一般要用去活性试剂去活以增加惰性。质量好的毛细管柱子高温后,去活层
  不应该变化,表现在对强极性样品或酸碱性样品的吸附性不能增加。

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